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一 細(xì)胞增殖檢測(cè)的意義
細(xì)胞增殖是生物體的重要生命特征,是生物體生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎(chǔ)。監(jiān)測(cè)細(xì)胞群的生長(zhǎng)對(duì)細(xì)胞的狀態(tài)研究很有必要。科研工作者們經(jīng)常需要檢測(cè)細(xì)胞增殖情況,比如驗(yàn)證抗腫瘤藥物的藥效時(shí),監(jiān)測(cè)細(xì)胞增殖及存活情況;研究腫瘤侵襲與轉(zhuǎn)移模型時(shí),分析細(xì)胞轉(zhuǎn)移或侵襲的路徑;分析創(chuàng)傷的修復(fù)或組織的重建時(shí),檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況等等。檢測(cè)細(xì)胞增殖及活性變化則可以很好的反映細(xì)胞的生長(zhǎng)狀況。
二 細(xì)胞增殖的研究方法
細(xì)胞增殖的研究方法有很多種,根據(jù)檢測(cè)原理不同,主要分為DNA合成檢測(cè)法、代謝活性檢測(cè)法、細(xì)胞增殖標(biāo)志物檢測(cè)法等。本文重點(diǎn)介紹DNA合成檢測(cè)之Brdu檢測(cè)法,傳統(tǒng)DNA合成檢測(cè)方法使用胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)摻入DNA,然后通過放射自顯影或閃爍計(jì)數(shù)對(duì)DNA進(jìn)行定量,該方法由于存在放射性物質(zhì)、實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng)、操作繁瑣,且需要昂貴的設(shè)備,目前已被BrdU(5-Bromo-2-deoxyuridine,5-溴脫氧尿嘧啶核苷)檢測(cè)方法取代,BrdU作為一種胸苷類似物,可選擇性地?fù)饺朐鲋臣?xì)胞的DNA中,而且可穩(wěn)定存在,并帶到子代細(xì)胞中,細(xì)胞經(jīng)過固定和變性處理后,可用免疫學(xué)方法檢測(cè)DNA中BrdU的含量,從而判斷細(xì)胞的增殖能力。
BrdU分子結(jié)構(gòu)
小編整理匯總了常見細(xì)胞增殖檢測(cè)方法,詳見下表。
細(xì)胞增殖檢測(cè)方法匯總
方法分類 |
檢測(cè)方法 |
檢測(cè)原理 |
DNA合成檢測(cè) |
Brdu檢測(cè)法 |
BrdU是胸腺嘧啶核苷的類似物,能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸苷摻入增殖細(xì)胞的DNA中,而后利用免疫學(xué)方法檢測(cè)DNA中BrdU的含量,從而判斷細(xì)胞增殖能力 |
DNA合成檢測(cè) |
胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)滲入法 |
用同位素3H標(biāo)記TdR作為DNA合成前體摻入DNA合成代謝過程,通過測(cè)定放射性強(qiáng)度,反應(yīng)細(xì)胞DNA代謝及增殖情況 |
代謝活性檢測(cè) |
MTT比色法 |
在活細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖過程中,線粒體內(nèi)的脫氫酶可將黃色的MTT分解成藍(lán)紫色的Formazan結(jié)晶,再利用酶標(biāo)儀測(cè)定,以反映出活細(xì)胞數(shù)目,間接反應(yīng)細(xì)胞增殖情況 |
細(xì)胞增殖標(biāo)志物檢測(cè) |
Ki67,PCNA,MCM-2等相關(guān)抗原檢測(cè) |
通過觀察增殖細(xì)胞中表達(dá)但非增殖細(xì)胞中不存在的特定蛋白質(zhì),來反映細(xì)增殖情況 |
熒光染料檢測(cè) |
羥基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺脂(CFSE)檢測(cè)法 |
CFSE是一種熒光染料,脂溶性高,進(jìn)入細(xì)胞,可以與胞內(nèi)氨基酸發(fā)生不可逆的結(jié)合,在細(xì)胞的分裂過程中能進(jìn)入子代細(xì)胞,同時(shí)熒光強(qiáng)度減半,再用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡進(jìn)行分析 |
實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)電極阻抗檢測(cè) |
RTCA實(shí)時(shí)無標(biāo)記細(xì)胞分析技術(shù) |
將微電極列陣整合在細(xì)胞培養(yǎng)板孔底部,構(gòu)建實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)、定量跟蹤細(xì)胞形態(tài)和增殖分化改變的細(xì)胞阻抗檢測(cè)傳感系統(tǒng)。當(dāng)微電極表面的細(xì)胞引起貼壁電極界面阻抗的改變時(shí),這種改變與細(xì)胞的實(shí)時(shí)功能狀態(tài)改變呈相關(guān)性 |
三 Exalpha Biologicals品牌BrdU檢測(cè)試劑盒
因組織細(xì)胞內(nèi)無內(nèi)源性BrdU存在,可利用BrdU相關(guān)抗體來檢測(cè)和定位摻入活躍增殖細(xì)胞新合成DNA的BrdU,Exalpha Biologicals 品牌BrdU檢測(cè)試劑盒的優(yōu)勢(shì)在于使用細(xì)胞層作為固相,將BrdU試劑摻入微孔板中的細(xì)胞,除了對(duì)細(xì)胞增殖情況進(jìn)行評(píng)估外,還可以從單個(gè)培養(yǎng)物中分析細(xì)胞數(shù)量、形態(tài)和細(xì)胞抗原等信息。同時(shí)Exalpha Biologicals 品牌BrdU檢測(cè)試劑盒可通過試劑盒自帶的固定/變性溶液一步完成細(xì)胞固定、透化和DNA變性等實(shí)驗(yàn)流程,大大縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。Exalpha Biologicals 品牌BrdU檢測(cè)試劑盒中包含檢測(cè)細(xì)胞增殖活性所需的所有組分、操作簡(jiǎn)便、無放射性、廣泛的樣本適用性,已得到眾多科研工作者的青睞。
四 Exalpha Biologicals品牌BrdU檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)
簡(jiǎn)便:提供預(yù)稀釋的滴管瓶,現(xiàn)用現(xiàn)配
安全:無放射性成分
完整:包含緩沖液、酶、陽性對(duì)照玻片和染色參考玻片
靈活:可用于任何物種組織樣本
靈敏:極低的背景干擾
經(jīng)濟(jì):成本低,高通量,多種規(guī)格
經(jīng)BrdU處理的小鼠小腸免疫組織化學(xué)染色圖
其他西美杰熱賣BrdU相關(guān)產(chǎn)品列表
品牌 |
貨號(hào) |
產(chǎn)品類型 |
產(chǎn)品名稱 |
應(yīng)用 |
Exalpha |
X1327K1 |
試劑試劑盒 |
BrdU Cell Proliferation Assay Kit |
ELISA |
Exalpha |
X1623K1 |
試劑試劑盒 |
BrdU Chemiluminescent Cell Proliferation Assay Kit |
ELISA |
Exalpha |
X1545K |
免疫組化試劑盒 |
BrdU Immunohistochemistry Kit |
ICC |
Cell Biolabs |
CBA-251 |
試劑試劑盒 |
CytoSelect? BrdU Cell Proliferation ELISA Kit |
ELISA |
Exalpha |
X1028 |
BrdU單抗 |
Mouse anti BrdU (bromodeoxyuridine) |
FC、IHC |
Exalpha |
MUB0200P |
BrdU抗體 |
Mouse anti Bromodeoxyuridine / BrdU |
FC、ICC、IHC(frozen & paraffin) |
Exalpha |
A205P |
BrdU多抗 |
Sheep anti BrdU (bromodeoxyuridine) |
FC、IHC(frozen & paraffin)、IP、WB |
Exalpha |
X1543M |
BrdU單抗 |
Mouse anti BrdU (bromodeoxyuridine), conjugated with FITC |
FC、IHC |
Agrisera |
AS16 3995 |
BrdU多抗 |
Bromodeoxyuridine |
IHC、IP、WB |
Agrisera |
AS16 3998 |
BrdU單抗 |
Bromodeoxyuridine (monoclonal, clone MoBU) |
determined by the investigator |
Exalpha |
X2834 |
BrdU試劑 |
Bromodeoxyuridine (BrdU) |
IHC |
西美杰代理的Exalpha Biologicals成立于1998年,是一家位于美國(guó)波士頓的生命科學(xué)公司,專門提供尖端抗體、試劑、試劑盒和定制IgY服務(wù)等。2016年5月Exalpha Biologicals與Nordic-MUbio達(dá)成長(zhǎng)期銷售協(xié)議,Exalpha Biologicals產(chǎn)品可通過Nordic-MUbio直接銷售給世界各地的客戶。Nordic-MUbio是一家總部位于荷蘭發(fā)展迅猛的抗體試劑公司,Nordic-MUbio提供單克隆抗體、生物標(biāo)志物、即用型流式細(xì)胞術(shù)抗體等產(chǎn)品組合。2022年4月Absolute Biotech將包括Absolute antibody、LSBio、Kerafast、Exalpha、Nordic-MUbio和Everest在內(nèi)多個(gè)生命科學(xué)品牌聯(lián)合成一個(gè)新公司,為世界各地的科研人員提供獨(dú)特抗體、細(xì)胞系、其他試劑及產(chǎn)品定制服務(wù)。欲了解更多產(chǎn)品信息,請(qǐng)?jiān)L問http://www.absolutebiotech.com。
北京西美杰科技有限公司是Absolute Biotech中國(guó)區(qū)代理,Exalpha Biologicals代理為用戶提供完善的技術(shù)和售后服務(wù)。如您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣,歡迎撥打全國(guó)客服熱線400-050-4006或登錄官網(wǎng)squareinfomatics.com查詢和了解。
參考文獻(xiàn)
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- Gray, J. (Ed), Special Issue: Monoclonal antibodies against bromodeoxyuridine Cytometry 1985, Vol. 6(6)